Շնորհակալություն Nature.com այցելելու համար: Ձեր օգտագործած զննարկչի տարբերակը ունի սահմանափակ CSS աջակցություն: Լավագույն արդյունքների համար խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել ավելի նոր զննարկիչ (կամ Internet Explorer- ում հաշմանդամության ռեժիմը անջատել): Միեւնույն ժամանակ, շարունակական աջակցություն ապահովելու համար մենք կցուցադրենք կայքը առանց ոճերի եւ JavaScript- ի:
MODIC փոփոխության կենդանական մոդելների ստեղծումը (MC) կարեւոր հիմք է ԲԿ-ն ուսումնասիրելու համար: Հիսունչորս Նոր Զելանդիայի սպիտակ նապաստակները բաժանվել են Sham-Operation Group, Muscle Implantation Group (ME Group) եւ Nucleus Pulposus Implantation Group (NPE Group): NPE Group- ում միջհամակարգային սկավառակն բացահայտվել է anterolateral lumbar վիրաբուժական մոտեցմամբ, եւ ասեղը օգտագործվում էր վերջնական ափսեի մոտ L5 ողնաշարավոր մարմինը պսակելու համար: NP- ն ներարկիչով արդյունահանվել է L1 / 2 միջերեսային սկավառակից եւ ներարկել դրա մեջ: Ենթածրագրի ոսկորների մեջ փոս հորատելը: Մկանների իմպլանտացիայի խմբում եւ Sham-Operation Group- ի վիրաբուժական ընթացակարգերը եւ հորատման մեթոդները նույնն էին, ինչ NP իմպլանտացիայի խմբում: Իմ խմբում մկանների մի կտոր տեղադրվեց անցքի մեջ, իսկ խայտառակ գործողության խմբում, ոչ մի բան դրվեց անցքի մեջ: Գործողությունից հետո կատարվել են MRI սկանավորման եւ մոլեկուլային կենսաբանական փորձարկում: NPE Group- ի ազդանշանը փոխվեց, բայց ակնհայտ ազդանշանի փոփոխություն չկար շամ-գործողությունների խմբում եւ իմ խմբում: Պատմաբանական դիտարկումը ցույց տվեց, որ Հյուսվածքների աննորմալ տարածումը դիտարկվել է իմպլանտացիայի վայրում, իսկ ԱՊՀ խմբում ավելացել է IL-4, IL-17 եւ IFN-արտահայտությունը: SubChondral Bone- ի ներմուծումը կարող է կազմել MC կենդանիների մոդել:
Modicals (MC) փոփոխություններ են ողնաշարավորներ եւ հարակից ոսկրածուծի ոսկրածուծի վնասվածքներ `տեսանելի մագնիսական ռեզոնանսային պատկերման վրա (MRI): Դրանք բավականին տարածված են Associated Symentoms1 ունեցող անհատների մեջ: Շատ ուսումնասիրություններ շեշտել են ԲԿ-ի կարեւորությունը `ցածր մեջքի ցավի (LBP) հետ ասոցիացիայի շնորհիվ (LBP) 2,3: De Roos et al.4- ը եւ Modic Et Al.5- ը նախեւառաջ նկարագրեցին եզրային ոսկրային ոսկրային ոսկրային ոսկրային ոսկրային ոսկրերի երկնքի երեք տարբեր տեսակներ: Modic Type I փոփոխությունները T1- կշռված (T1W) հաջորդականություններում եւ հիպերտենթում են T2 կշռված (T2W) հաջորդականություններում: Այս վնասվածքը բացահայտում է ճեղքվածքի վերափոխումներն ու հարակից անոթային հատիկավոր հյուսվածքը ոսկրածուծի մեջ: Modic Type II- ի փոփոխությունները ցույց են տալիս բարձր ազդանշան ինչպես T1W, այնպես էլ T2W հաջորդականություններում: Այս տեսակի ախտահարում կարելի է գտնել ավարտական ոչնչացում, ինչպես նաեւ հարակից ոսկրային ոսկրերի հիստոլոգիական ճարպը: Modic Type III- ի փոփոխությունները ցույց են տալիս ցածր ազդանշան T1W եւ T2W հաջորդականություններում: Դիտարկվել են մոնտաժայիններին համապատասխան սկլերոտիկ վնասվածքներ: ԲԿ-ն համարվում է ողնաշարի պաթոլոգիական հիվանդություն եւ սերտորեն կապված է ողնաշարի շատ դեգեներատիվ հիվանդությունների հետ `7,8,9:
Հաշվի առնելով առկա տվյալները, մի քանի ուսումնասիրություններ մանրամասն պատկերացումներ են տվել MC- ի էթոլոգիայի եւ պաթոլոգիական մեխանիզմների վերաբերյալ: Albert et al. Առաջարկվում է, որ ԲԿ-ն կարող է առաջանալ սկավառակի ժառանգության կողմից: Hu et al. վերագրեց MC- ը Disp Disc Devegeneration10- ի համար: Կրոկը առաջարկել է «ներքին սկավառակի կոտրման» հայեցակարգը, որը նշում է, որ կրկնվող սկավառակի տրավման կարող է հանգեցնել ծայրամասում միկրոկոտարի: Cleft ձեւավորումից հետո միջուկային պղպեղի (NP) խորքային ոչնչացումը կարող է առաջացնել աուտոիմունի պատասխան, ինչը հետագայում հանգեցնում է MC11- ի զարգացմանը: Ma et al. կիսվել է նմանատիպ տեսակետ եւ հաղորդել է, որ NP- ի կողմից առաջացած AutoMimunity- ը առանցքային դեր է խաղում MC12- ի պաթոգենեզում:
Իմունային համակարգի բջիջները, հատկապես CD4 + T օգնական լիմֆոցիտները, կրիտիկական դեր են խաղում AutoimMunity13- ի պաթոգենեզում: Վերջերս հայտնաբերված Th17 ենթաբազմությունը արտադրում է Protfulfulative Cytokine IL-17, խթանում է քիմոկինի արտահայտությունը եւ խթանում է T բջիջները վնասված օրգանների մեջ `IFN-γ14 արտադրելու համար: Th2 բջիջները նույնպես յուրահատուկ դեր են խաղում իմունային պատասխանների պաթոգենեզում: IL-4- ի արտահայտումը որպես ներկայացուցիչ Th2 բջիջ կարող է հանգեցնել ծանր իմունոպատոլոգիական հետեւանքների 15-ի:
Չնայած շատ կլինիկական ուսումնասիրություններ են անցկացվել MC16,17,18,19,20,21,22223444 թվականների վրա, դեռեւս կա կենդանական փորձարարական համապատասխան մոդելների պակաս, որոնք կարող են ընդօրինակել MC գործընթացը, որը հաճախակի է լինում օգտագործվում էր հետաքննելու էթոլոգիան կամ նոր բուժումները, ինչպիսիք են նպատակային թերապիան: Մինչ օրս, հաղորդվել է միայն MC- ի կենդանական մի քանի մոդելներ, ուսումնասիրելու հիմքում ընկած պաթոլոգիական մեխանիզմները:
Albert- ի եւ MA- ի առաջարկած աուտոիմունի տեսության հիման վրա Այս ուսումնասիրությունը սահմանեց մի պարզ եւ վերարտադրվող նապաստակի MC մոդելը `AutoTransplanting NP- ի կողմից փորված ողնաշարավոր պողպատի մոտակայքում: Այլ նպատակներ են դիտարկել կենդանիների մոդելների հիստոլոգիական բնութագրերը եւ գնահատել ԱԱԾ հատուկ մեխանիզմները MC- ի զարգացման գործում: Այդ նպատակով մենք օգտագործում ենք տեխնիկա, ինչպիսիք են մոլեկուլային կենսաբանությունը, MRI եւ Histological ուսումնասիրությունները `MC- ի առաջընթացը ուսումնասիրելու համար:
Վիրաբուժության ընթացքում արյունահոսությունից մահացել է երկու նապաստակ, իսկ չորս նապաստակ մահացել է MRI- ի ընթացքում անզգայացման ժամանակ: Մնացած 48 նապաստակները վիրահատությունից հետո գոյատեւեցին եւ ոչ մի վարքային կամ նյարդաբանական նշաններ ցույց տվեցին:
MRI- ն ցույց է տալիս, որ ներկառուցված հյուսվածքի ազդանշանային ինտենսիվությունը տարբեր անցքերի մեջ տարբեր է: L5 VerteBral մարմնի ազդանշանի ինտենսիվությունը NPE Group- ում աստիճանաբար փոխվում է 12, 16 եւ 20 շաբաթվա ընթացքում `տեղադրվելուց հետո (T1W հաջորդականությունը ցույց տվեց ցածր ազդանշան, եւ T2W հաջորդականությունը ցույց տվեց խառը ազդանշան) (նկար 1C) Ներկառուցված մասերի մյուս երկու խմբերից նույն ժամանակահատվածում մնաց համեմատաբար կայուն (Նկար 1 Ա, բ):
Ա) նապաստակի Lumbar ողնաշարի ներկայացուցչական հաջորդական MRI- ն 3 ժամային կետերում: Շամ-գործողությունների խմբի պատկերներում ազդանշանային աննորմալություններ չեն հայտնաբերվել: (Բ) Իմ խմբում ողնաշարավոր մարմնի ազդանշանային բնութագրերը նման են շամ-գործողությունների խմբում գտնվողներին, եւ ժամանակի ընթացքում նշանակալի ազդանշանի փոփոխություն չի նկատվում: Գ) NPE Group- ում ցածր ազդանշանը հստակ տեսանելի է T1W հաջորդականության մեջ, եւ խառը ազդանշանը եւ ցածր ազդանշանը հստակ տեսանելի են T2W հաջորդականության մեջ: 12-շաբաթյա ժամանակահատվածից մինչեւ 20-ամյա ժամկետը, T2W հաջորդականության ցածր ազդանշաններով շրջապատող ինքնաբուխ բարձր ազդանշանները նվազում են:
Ակնհայտ ոսկրային հիպերպլազիա կարելի է տեսնել NPE Group- ի ողնաշարավոր մարմնի իմպլանտացիայի կայքում, իսկ ոսկրային հիպերպլազիան առաջանում է 12-ից 20 շաբաթվա ընթացքում (Նկար 2C) `NPE Group- ի համեմատ, մոդելավորված ողնաշարավոր մարմիններ; Sham Group եւ Me Group (Նկար 2C) 2a, B):
Ա) Վերաթողային մարմնի մակերեսը փոխպատվաստված մասում շատ հարթ է, անցքը լավ է բուժվում, եւ ողնաշարավոր մարմնում հիպերպլազիա չկա: (Բ) Իմ խմբում իմպլանտացված կայքի ձեւը նման է Sham Operation Group- ում, եւ ժամանակի ընթացքում փոխպատվաստված կայքի արտաքին տեսքի ակնհայտ փոփոխություն չկա: Գ) Ոսկրածուծի հիպերպլազիան տեղի է ունեցել NPE Group- ի փոխպատվաստման վայրում: Ոսկրածուծի հիպերպլազիան արագորեն աճեց եւ նույնիսկ տարածվեց միջգերող սկավառակով `հակահարվածի ողնաշարավոր մարմինը:
Պատմաբանական վերլուծությունը ներկայացնում է ավելի մանրամասն տեղեկություններ ոսկրերի ձեւավորման մասին: Գծապատկեր 3-ը ցույց է տալիս հետվիրահատական հատվածների լուսանկարները H & E- ով: Շամ-գործողությունների խմբում լավ կազմակերպված էին շոշափողներ, եւ ոչ մի բջջային տարածում չի հայտնաբերվել (Նկար 3A): Իմ խմբում իրավիճակը նման էր շամ-գործողությունների խմբում (Նկար 3B): Այնուամենայնիվ, NPE Group- ում մեծ թվով քոնդրոկիտներ եւ ներխուժման վայրում տարածվել են ԱԿ-ի նման բջիջների տարածումը (Նկար 3C);
Ա) Trabeculae- ն կարելի է տեսնել վերջի ափսեի մոտ, քոնդրոցիտները կոկիկորեն կազմակերպվում են բջիջների միասնական չափի եւ ձեւի եւ ոչ տարածման հետ (40 անգամ): (Բ) Իմ խմբում իմպլանտացիայի կայքի վիճակը նման է Sham Group- ի: Թրաբեկուլան եւ շոնջիթներ կարելի է տեսնել, բայց իմպլանտացիայի կայքում ակնհայտ տարածում չկա (40 անգամ): Բ) կարելի է տեսնել, որ շոնացի եւ NP- ի նման բջիջները զգալիորեն տարածվում են, եւ շոշափողների ձեւն ու չափը անհավասար են (40 անգամ):
Interleukin 4 (IL-4) MRNA, Interlesukin 17 (IL-17) MRNA- ի եւ Interferon γ (IFN-γ) MRNA- ն դիտվել են ինչպես NPE- ն, այնպես էլ ինձ խմբերը: Երբ համեմատվում էին նպատակային գեների արտահայտման մակարդակը, ԱՏ -4, Իլ -17-ի եւ IFN- ի եւ IFN--ի արտահայտությունները զգալիորեն աճել են NPE Group- ում, համեմատած ME խմբի եւ Sham Operation Group- ի հետ (Նկար 4) (P <0.05): Շամ շահագործման խմբի համեմատ, IL-4, IL-17- ի եւ IFN- ի IF- ի եւ IFN-γ- ի արտահայտման մակարդակը բարձրացել է միայն թեթեւակի եւ չի հասել վիճակագրական փոփոխության (p> 0.05):
IL-4, IL-17 եւ IFN-17- ի MRNA- ի արտահայտությունը NPE Group- ում ցույց տվեց զգալիորեն ավելի բարձր միտումը, քան Sham Operation Group- ում եւ ME Group (P <0.05):
Ի հակադրություն, իմ խմբում արտահայտվելու մակարդակները ոչ մի էական տարբերություն չեն ցուցաբերում (p> 0.05):
Արեւմտյան բլոտի վերլուծությունը կատարվել է il-4 եւ il-17- ի դիմաց առեւտրի առումով մատչելի հակամարմինների միջոցով `հաստատելու փոփոխված MRNA արտահայտման օրինաչափությունը: Ինչպես ցույց է տրված 5 ա, B- ում, B- ի համեմատ, խմբի եւ խայտառակ գործողությունների խմբի հետ, NPE Group- ում IL-4 եւ IL-17- ի սպիտակուցի մակարդակը զգալիորեն աճել է (P <0.05): Շամ գործողությունների խմբի համեմատ, իմ խմբում IL-4- ի եւ IL-17- ի սպիտակուցի մակարդակը նույնպես չկարողացավ հասնել վիճակագրական էական փոփոխությունների (p> 0.05):
Ա) NPE խմբում IL-4 եւ IL-17- ի սպիտակուցի մակարդակը զգալիորեն բարձր էր, քան իմ խմբի եւ պլացեբոյի խմբի (P <0.05): (Բ) արեւմտյան բլոտի պատմագրություն:
Վիրաբուժության ընթացքում ձեռք բերված մարդու նմուշների սահմանափակ քանակի պատճառով MC- ի պաթոգենեզի վերաբերյալ հստակ եւ մանրամասն ուսումնասիրությունները փոքր-ինչ դժվար են: Մենք փորձեցինք ստեղծել MC- ի կենդանական մոդել, ուսումնասիրելու իր հավանական պաթոլոգիական մեխանիզմները: Միեւնույն ժամանակ, RADION AUTOGRAFT- ի կողմից MC- ի ընթացքին հետեւելու համար օգտագործվել է ճառագայթաբանական գնահատման, հիստոլոգիական գնահատման եւ մոլեկուլային կենսաբանական գնահատումը: Արդյունքում, NP իմպլանտացիայի մոդելը հանգեցրեց ազդանշանային ինտենսիվության աստիճանական փոփոխության 12-ից 20-ից 20-շաբաթյա կետեր (խառը ցածր ազդանշան T2W հաջորդականության մեջ), նշելով հյուսվածքի փոփոխությունները եւ հիստոլոգիական եւ մոլեկուլային Կենսաբանական գնահատականները հաստատեցին ռադիոլոգիական ուսումնասիրության արդյունքները:
Այս փորձի արդյունքները ցույց են տալիս, որ տեսողական եւ հիստոլոգիական փոփոխություններ տեղի են ունեցել NPE Group- ում ողնաշարավոր մարմնի խախտման վայրում: Միեւնույն ժամանակ, նկատվել են IL-4, IL-17 եւ IFN-γ գեների արտահայտություն, ինչպես նաեւ IL-4, IF-17 եւ IFN-17 եւ IFN--ի արտահայտությունը, նշելով, որ ուղղաձիգում ինքնահավանական միջուկային պղպեղի հյուսվածքի խախտումը մարմինը կարող է առաջացնել մի շարք ազդանշանային եւ ձեւաբանական փոփոխություններ: Հեշտ է գտնել կենդանիների մոդելի ողնաշարավոր մարմինների ազդանշանային բնութագրերը (T1W հաջորդականության մեջ ցածր ազդանշան T2W հաջորդականության մեջ) շատ նման են մարդկային ողնաշարավոր բջիջների եւ MRI բնութագրերի Հաստատեք պատմաբանության եւ համախառն անատոմիայի դիտարկումները, այսինքն `ողնաշարավոր մարմնի բջիջների փոփոխությունները առաջադիմական են: Չնայած սուր վնասվածքների հետեւանքով առաջացած բորբոքային արձագանքը կարող է հայտնվել ծակոտկենից անմիջապես հետո, MRI- ի արդյունքները ցույց տվեցին, որ առաջադիմական մեծացման ազդանշանային փոփոխությունները հայտնվել են 12 շաբաթ անց պոտպիտալից եւ պահպանվել են մինչեւ 20 շաբաթվա ընթացքում: Այս արդյունքները ենթադրում են, որ AutoGous vertebral NP- ը նապաստակների մեջ առաջադիմական MV- ի ստեղծման հուսալի մեթոդ է:
Այս պունկցիայի մոդելը պահանջում է համարժեք հմտություն, ժամանակ եւ վիրաբուժական ջանք: Նախնական փորձարկումներում paravertebral կապիկ կառույցների արտահոսքը կամ ավելորդ խթանումը կարող են հանգեցնել ողնաշարավոր օստեոֆիտների ձեւավորմանը: Պետք է զգույշ լինել չվնասել կամ նյարդայնացնել հարակից սկավառակները: Քանի որ ներթափանցման խորությունը պետք է վերահսկվի հետեւողական եւ վերարտադրվող արդյունքներ ստանալու համար, մենք ձեռքով պատրաստեցինք մի վարդակից `կտրելով 3 մմ երկար ասեղի ծածկը: Այս վարդակից օգտագործելը ապահովում է վերեւի մարմնում հորատման միատեսակ խորությունը: Նախնական փորձարկումներում գործողության մեջ ներգրավված երեք օրթոպեդիկ վիրաբույժներ ավելի հեշտ են հայտնաբերել 16 չափիչ ասեղներ, ավելի հեշտ է աշխատել, քան 18 հատանոց ասեղներով կամ այլ մեթոդներով: Հորատման ժամանակ չափազանց արյունահոսությունից խուսափելու համար ասեղը մի որոշ ժամանակ պահելը կտրամադրի ավելի հարմար մուտքագրման անցք, առաջարկելով, որ այս եղանակով որոշակի ԲԿ-ի որոշակի աստիճան կարող է վերահսկվել:
Չնայած շատ ուսումնասիրություններ ունեն թիրախային MC, քիչ բան է հայտնի MC25,26,27- ի էթոլոգիայի եւ պաթոգենեզի մասին: Ելնելով մեր նախորդ ուսումնասիրությունների վրա, մենք պարզեցինք, որ AutoMimunity- ը առանցքային դեր է խաղում MC12- ի առաջացման եւ զարգացման գործում: Այս ուսումնասիրությունը ուսումնասիրեց IL-4, IL-17- ի եւ IFN-F γ քանակական արտահայտությունը, որոնք CD4 + բջիջների հիմնական տարբերակիչ ուղիներն են `անտիգեն խթանումից հետո: Մեր ուսումնասիրության մեջ, համեմատած բացասական խմբի հետ, NPE խումբը ավելի բարձր արտահայտություն ուներ IL-4, IL-17, եւ IFN-γ, եւ ավելի բարձր էին IL-4 եւ IL-17- ի սպիտակուցի մակարդակը:
Կլինիկականորեն, IL-17 MRNA արտահայտությունը NP բջիջներում ավելանում է սկավառակի հերնման 28-ով հիվանդների կողմից: IL-4- ի ավելացում եւ IFN-γ արտահայտության մակարդակները հայտնաբերվել են նաեւ սուր ոչ սեղմիչ սկավառակի հերզների մոդելի մեջ `համեմատած առողջ հսկողության հետ 29: IL-17- ը առանցքային դեր է խաղում բորբոքման, հյուսվածքների վնասվածքի մեջ AutoMimune հիվանդություններում 30 եւ ուժեղացնում է իմունային պատասխանը IFN-31- ին: Ընդլայնված IL-17- ի կողմից միջնորդավորված հյուսվածքների վնասվածք է հաղորդվել MRL / LPR MICE32 եւ AutoMimunity-Susceptible Mice33- ում: IL-4- ը կարող է խանգարել Proinflammative Cytokines- ի արտահայտությունը (օրինակ, IL-1β եւ TNFα) եւ մակրոֆաժային ակտիվացում 34: Հաղորդվում էր, որ IL-4- ի MRNA արտահայտությունը տարբեր էր NPE խմբում `համեմատած IL-17- ի եւ IFN-γ միեւնույն ժամանակ: NPE խմբում IFN-γ- ի MRNA արտահայտությունը զգալիորեն ավելի բարձր էր, քան մյուս խմբերը: Հետեւաբար, IFN- γ Արտադրություն կարող է լինել NP միջքաղաքացիայի հետեւանքով բորբոքային արձագանքի միջնորդ: Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ IFN-γ- ն արտադրվում է բազմաթիվ բջջային տեսակների կողմից, ներառյալ ակտիվացված տիպի 1 օգնական T բջիջները, բնական մարդասպան բջիջները եւ մակրոֆագները 37-ը:
Այս ուսումնասիրությունը ենթադրում է, որ AutoMimune պատասխանը կարող է ներգրավվել ԲԿ-ի առաջացման եւ զարգացման մեջ: Luoma et al. Պարզվել է, որ MC- ի եւ նշանավոր NP ազդանշանային բնութագրերը նման են MRI- ին, եւ երկուսն էլ բարձր ազդանշան են ցուցադրում T2W հաջորդականության 38-ում: Որոշ ցիտոկիններ հաստատվել են, որ սերտորեն կապված են ԲԿ-ի առաջացման հետ, ինչպիսիք են IL-139: Ma et al. Առաջարկվում է, որ ԱԿ-ի վերեւ կամ ներքեւ ձգձգումը կարող է մեծ ազդեցություն ունենալ MC12- ի առաջացման եւ զարգացման վրա: Bobechko40- ը եւ Herzbein et al.41- ը հայտնում են, որ NP- ն իմունոտոլոգիական հյուսվածք է, որը չի կարող մտնել անոթային շրջանառություն ծննդյան ժամանակ: NP- ի ձգձգումները արտասահմանյան մարմիններին ներկայացնում են արյան մատակարարման մեջ, դրանով իսկ միջնորդելով տեղական Autoimmune Reactions42- ը: Autoimmune Reactions- ը կարող է առաջացնել մեծ թվով իմունային գործոններ, եւ երբ այդ գործոնները շարունակաբար ենթարկվում են հյուսվածքների, դրանք կարող են ազդանշանային փոփոխություններ առաջացնել 43-ում: Այս ուսումնասիրության մեջ IL-4, IL-17- ի եւ IFN--ի գերբեռնվածությունը հանդիսանում է իմունային իմունային գործոններ, հետագայում ապացուցելով NP- ի եւ MCS44 սերտ կապը: Կենդանիների այս մոդելը լավ է ընդօրինակում NP- ի առաջխաղացումը եւ մուտքը դեպի վերջի ափսե: Այս գործընթացը հետագայում բացահայտեց AutoMimunity- ի ազդեցությունը MC- ում:
Ինչպես եւ սպասվում էր, այս կենդանիների մոդելը մեզ հնարավորություն է տալիս «ԲԿ» -ը սովորելու հնարավոր հարթակ: Այնուամենայնիվ, այս մոդելը դեռ ունի որոշակի սահմանափակումներ. Նախ, կենդանիների դիտորդական փուլում որոշ միջանկյալ փուլային նապաստակներ պետք է էվթանացվեն պատմական եւ մոլեկուլային կենսաբանության փորձարկման համար, այնպես որ որոշ կենդանիներ «ժամանակի ընթացքում ընկնում են»: Երկրորդ, չնայած այս ուսումնասիրության մեջ դրված են երեք անգամ միավոր, ցավոք, մենք միայն մոդելավորեցինք MC- ի մեկ տեսակ (փոփոխի փոփոխություն), ուստի պետք է սահմանել մարդկային հիվանդությունների զարգացման գործընթացը Ավելի լավ է պահպանել ազդանշանային բոլոր փոփոխությունները: Երրորդ, հյուսվածքների կառուցվածքի փոփոխությունները իսկապես կարող են հստակ ցույց տալ հիստոլոգիական ներկառությամբ, բայց որոշ մասնագիտացված տեխնիկա կարող է ավելի լավ բացահայտել այս մոդելի միկրոտրկառուկային փոփոխությունները: Օրինակ, բեւեռացված լույսի մանրադիտակը օգտագործվել է նապաստակի միջհամակարգային սկավառակներում Fibrocartible Discs45- ի ձեւավորումը վերլուծելու համար: NP- ի երկարաժամկետ հետեւանքները MC- ի եւ EndPlate- ի վրա պահանջում են հետագա ուսումնասիրություն:
Հիսունհինգ արական նոր Զելանդիայի սպիտակ նապաստակները (քաշը մոտ 2,5-3 կգ-ից 3-3,5 ամիս) պատահականորեն բաժանվել են Sham Operation Group, Muscle Implantation Group (ME խումբ) եւ նյարդային Root ImplanDation Group (NPE Group): Բոլոր փորձարարական ընթացակարգերը հաստատվել են Թիանջինի հիվանդանոցի էթիկայի հանձնաժողովի կողմից, եւ փորձարարական մեթոդներն իրականացվել են հաստատված ուղեցույցների խստագույն համաձայն:
Որոշ բարելավումներ են կատարվել S. Sobajima 46-ի վիրաբուժական տեխնիկայի վրա: Յուրաքանչյուր նապաստակ տեղադրվել է կողային վերամշակման դիրքում եւ հինգ անընդմեջ Lumbar միջերկրային սկավառակների (IVDS) առաջի մակերեսը բացահայտվել է հետաձգել հետաձգման հետադարձ կապի մասին: Յուրաքանչյուր նապաստակ տրվել է ընդհանուր անզգայացում (20% urethane, ականջի երակով 5 մլ / կգ): Երկարատեւ մաշկի կտրում է եղեւսի ստորին եզրից մինչեւ pelvic եզրը, 2 սմ փորոքի վրա `paravertebral մկանների համար: L1- ից L6- ի ճիշտ anterolater ողնաշարը ենթարկվում էր գերլարված ենթամաշկային հյուսվածքի, հետադարձային հյուսվածքի եւ մկանների կտրուկ եւ բութ հեռացումով: Սկավառակի մակարդակը որոշվեց, օգտագործելով pelvic brim- ը `որպես անատոմիական ուղենիշ, L5-L6 սկավառակի մակարդակի համար: L5 Vertebra- ի վերջնական ափսեի մեջ փոս փորելու համար օգտագործեք 16 ժանրի պունկցիայի ասեղ `3 մմ խորության վրա: Օգտագործեք 5 մլ ներարկիչ, L1-L2 միջերկրեբուն սկավառակով ինքնավստահ միջուկային պղպեղը ձգտելու համար (Նկար 6C): Հեռացրեք միջուկի պղպեղը կամ մկանները `յուրաքանչյուր խմբի պահանջների համաձայն: Հորատանցքի անցքը խորանալուց հետո ներծծվող կարերը տեղադրվում են խորը ֆասիայի, մակերեսային ֆասիայի եւ մաշկի վրա, վիրահատության ընթացքում հոգ տանելով վնասվածքի մարմնի պերիոստային հյուսվածքը:
Ա) L5-L6 սկավառակը ենթարկվում է հետաձգել հետաձգման հետադարձման միջոցով: Բ) L5- ի վերջի մոտակայքում փոս փորելու համար օգտագործեք 16 ժանրի ասեղ: Գ) բարոյական MF- ները հավաքվում են:
Ընդհանուր անզգայացումը կառավարվել է 20% urethane- ով (5 մլ / կգ), որն իրականացվում է ականջի երակային միջոցով, իսկ Lumbar ողնաշարի ճառագայթագրությունները կրկնվում են 12, 16 եւ 20 շաբաթ հետվիրահատականորեն:
Rab ագարները զոհաբերվել են Քեթամինի (25.0 մգ / կգ) եւ ներերակային նատրիումի ներերակային պենտբարբիտալի (1.2 գ / կգ) `վիրահատությունից հետո 12, 16 եւ 20 շաբաթ: Ամբողջ ողնաշարը հանվել է հիստոլոգիական վերլուծության համար, եւ իրականացվում է իրական վերլուծություն: Հակադարձող հակադարձ տառադարձումը (RT-QPCR) եւ արեւմտյան բլոտինգը օգտագործվել են իմունային գործոնների փոփոխությունները հայտնաբերելու համար:
MRI քննությունները կատարվել են նապաստակներում, օգտագործելով 3.0 տ կլինիկական մագնիտ (GE բժշկական համակարգեր, Florence, SC), որոնք հագեցած են օրթոգոնալ վերջույթների կծիկ ստացողով: Rab ագարներ ականջի երակով 20% urethane- ով (5 մլ / կգ) էին, այնուհետեւ տեղավորվում են մագնիսի մեջ `Լումբարի շրջանի մեջ, որը կենտրոնացած է 5 դյույմ տրամագծով շրջանաձեւ մակերեսով (GE բժշկական համակարգեր): Coronal T2- ի կշռված տեղացիների պատկերներ (TR, 1445 MS; TE, 37 MS) ձեռք է բերվել L3-L4- ից L5-L6- ից L3-L0 L6- ի գտնվելու վայրը սահմանելու համար: Sagittal Plane T2- կշռված կտորները ձեռք են բերվել հետեւյալ պարամետրերով. Արագ Spin-Echo հաջորդականությունը կրկնվող ժամանակի (TR) 2200 MS- ի եւ Echo Time (TE) 70 MS- ի, մատրիցա. 260 եւ ութ խթանների տեսողական դաշտ; Կտրող հաստությունը 2 մմ էր, բացը 0,2 մմ էր:
Վերջին լուսանկարը վերցնելուց հետո, իսկ վերջին նապաստակը սպանվեց, խայտառակ, մկաններ ներկառուցված եւ NP սկավառակները հանվեցին հիստոլոգիական փորձաքննության համար: Հյուսվածքները սահմանվել են 1 շաբաթվա ընթացքում 10% չեզոք բուֆերային ֆորմալինի մեջ, որոնք քայքայվել են էթիլենիմինետրաաթրաֆիկաթթուով եւ պարաֆին հատվածով: Հյուսվածքային բլոկները ներկառուցված էին պարաֆինով եւ կտրեցին աղետալի հատվածներ (5 մկմ հաստ) միկրոտոմի միջոցով: Բաժինները վիտրաժներ էին հեմաթոքսիլինի եւ Eosin- ի հետ (H & E):
Յուրաքանչյուր խմբում նապաստակներից միջերեսային սկավառակները հավաքելուց հետո ընդհանուր RNA- ն արդյունահանվեց UniQ-10 սյունակի միջոցով (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., Չինաստան): , Մեդիսոն, Վի, ԱՄՆ): Հակադարձ տարածումը կատարվեց:
RT-QPCR- ն իրականացվել է Prism 7300 (կիրառական BioSystems Inc., USA) եւ SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, Mo, ԱՄՆ): PCR արձագանքման ծավալը 20 մկլ էր եւ պարունակում էր 1,5 մկլ նոսրացված CDNA եւ յուրաքանչյուր այբբենարանի 0.2 մկմ: Նախաներկերը նախագծվել են Oligoperfect Designer- ի (Invitrogen, Valencia, CA) եւ արտադրվում է Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (Չինական) (Աղյուսակ 1): Օգտագործվել են հետեւյալ ջերմային հեծանվավազքի պայմանները. Նախնական պոլիմերազի ակտիվացման քայլը `94 ° C ջերմաստիճանում, ապա 40 ցիկլը 15-ից յուրաքանչյուրը 94 ° C ջերմապիտակեցման դեպքում, 60 ° C ջերմաստիճանում: Չափումները կատարվել են 1 րոպե 72 ° C ջերմաստիճանում: Բոլոր նմուշները երեք անգամ ուժեղացվել են, եւ միջին արժեքը օգտագործվել է RT-QPCR վերլուծության համար: Ամրապնդման տվյալները վերլուծվել են FlexStation 3 (Molecular սարքեր, Sunnyvale, CA, ԱՄՆ): IL-4, IL-17, եւ IFN-γ Gene Gene արտահայտությունը նորմալացվել է էնդոգեն վերահսկողությանը (ACTB): Թիրախային MRNA- ի հարաբերական արտահայտման մակարդակները հաշվարկվել են 2-δδCT մեթոդով:
Ընդհանուր սպիտակուցը արդյունահանվել է հյուսվածքներից `օգտագործելով հյուսվածքային հոմոգենիզատոր, Ripa Lysy Buffer- ում (պարունակում է պրոտե եւ ֆոսֆատազերծված խանգարիչ կոկտեյլ), իսկ հետո ցենտրիֆորցվում է 4 ° C ջերմաստիճանում: Սպիտակուցի հիսուն միկրոգրը բեռնված էր մեկ գոտիով, առանձնացված 10% SDS էջում, այնուհետեւ փոխանցվում է PVDF թաղանթին: Արգելափակումը կատարվել է Tris-Buffered Saline- ում 5% չմշակված չոր կաթում, որը պարունակում է 0,1% Tween 20-ը `1 ժամ սենյակի ջերմաստիճանում: Մեմբրանը ինկուբացվել է նապաստակի դեմ դեկորինային առաջնային հակամարմիններով (նոսրացված 1: 200; Boster, Wuhan, Չինաստան) (նոսրացված է 1: 200; Bioss, Պեկին, Չինաստան) մեկ գիշերվա ընթացքում 4 ° C- ով եւ արձագանքեց երկրորդ օրերին. Միջնակարգ հակամարմինով (այծի հակա-նապաստակ immunoglobulin g- ով 1: 40,000 նոսրացում) զուգակցված ծովաբողկ պերոքսիդազի (Boster, Wuhan, China) սենյակների համար `սենյակային ջերմաստիճանում: Արեւմտյան բլոտի ազդանշանները հայտնաբերվել են քիմիլյումների քիմիլմատիկ թաղանթում, ռենտգեն ճառագայթային ճառագայթումից հետո: Դաժանաչափաչափական վերլուծության համար բլոկները սկանավորվել են եւ քանակականացվել, օգտագործելով Bandscan ծրագրակազմ, եւ արդյունքները արտահայտվում էին որպես Tubulin Immunoreactivity- ի նպատակային գենի իմունորականության հարաբերակցությունը:
Վիճակագրական հաշվարկներն իրականացվել են SPSS16.0 ծրագրային փաթեթով (SPSS, ԱՄՆ) օգտագործմամբ: Ուսումնասիրության ընթացքում հավաքված տվյալներն արտահայտվել են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում (միջին ± SD) եւ վերլուծվել `օգտագործելով տարբերությունները (ANOVA) տարբերությունները որոշելու համար: P <0.05 համարվում էր վիճակագրական նշանակություն:
Այսպիսով, ԲԿ-ի կենդանական մոդելի ստեղծումը `պատկերացնելով ինքնավստահ NPS ողնաշարավոր մարմինը եւ մակրոատոմիական դիտարկումը, MRI վերլուծությունը, հիստոլոգիական գնահատումը եւ մոլեկուլային կենսաբանական վերլուծությունը կարող է դառնալ մարդու MC- ի մեխանիզմների գնահատման եւ հասկանալու կարեւոր գործիք միջամտություններ:
Ինչպես մեջբերել այս հոդվածը. Han, C. et al. Մոդական փոփոխությունների կենդանիների մոդելը ստեղծվել է `պատկերավոր միջուկային պղպեղը փոխպահովելով Lumbar ողնաշարի ենթահանձնաժողովի ենթամաշկային ոսկորի մեջ: SCI. Rep. 6, 35102: 10.1038 / SREP35102 (2016):
Վինիշափեպ, Դ. Մի շարք Գնահատել Ռադիոլոգիա 209, 661-666, DOI: 10.1148 / Radiology.209.3.9844656 (1998):
Քաեր, Պ., Կորշհոլմ, Լ. Եվրոպական ողնաշարի հանդես. Եվրոպական ողնաշարի հասարակության պաշտոնական հրապարակումը, ողնաշարի եվրոպական հասարակության եվրոպական հասարակությունը եւ արգանդի վզիկի ողնաշարի ուսումնասիրության եվրոպական հասարակությունը 15, 1312-1319, DOI: 10.1007 / S00586-006-018-0185-X (2006):
Կուիզմա, Մ. Եւ Ալ. Lumbar ողնաշարավոր ծայրերում փոփոխություններ. Տարածում եւ ասոցիացիա ցածր մեջքի ցավի եւ Sciatica- ի միջին տարիքի տղամարդկանց աշխատողների մեջ: Ողնաշար 32, 1116-1122, DOI: 10.1097 / 01.brs.0000261561.12944.FF (2007):
De Roos, A., K. Աջ. Ամերիկյան ռեդիոլոգիայի ռեդիոլոգիայի 149, 531-534, DOI: 10.2214 / AJR.149.3.531 (1987):
Modic, Mt, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, Tj եւ Carter, JR դեգեներատիվ սկավառակի հիվանդություն. MRI- ի հետ vertebral ոսկրերի փոփոխությունների գնահատում: Ռադիոլոգիա 166, 193-199, DOI: 10.1148 / Radiology.166.1.3336678 (1988):
Modic, Mt, Masaryk, Tj, Ross, JS եւ Carter, դեգեներատիվ սկավառակի հիվանդության կրիչ պատկերացում: Ռադիոլոգիա 168, 177-186, DOI: 10.1148 / Radiology.168.1.3289089 (1988):
Jensen, ts, et al. Ընդհանուր բնակչության մեջ NeoverTrebral- ի ազդանշանային փոփոխությունների կանխատեսումները: Եվրոպական ողնաշարի հանդես. Եվրոպական ողնաշարի հասարակության պաշտոնական հրապարակումը, ողնաշարի եվրոպական հասարակության եվրոպական հասարակությունը եւ արգանդի վզիկի ողնաշարի ուսումնասիրության եվրոպական հասարակությունը, Division, 199-135 / S00586-5-5 (2010):
Albert, HB եւ Mannisch, K. Modic փոփոխություններ Lumbar Disc- ի հերնյացիայից հետո: Եվրոպական ողնաշարի ամսագիր. Եվրոպական ողնաշարի հասարակության պաշտոնական հրապարակումը, ողնաշարի եվրոպական հասարակության եվրոպական հասարակությունը եւ արգանդի վզիկի ողնաշարի հետազոտության եվրոպական հասարակությունը 16, 977-982, DOI: 10.1007 / S00586-0336-8 (2007):
Կերտտուլա, Լ., Լուոմա, Կ., Տրանսպորտ, Տ., Գրոնբլադ, Մ. Եվրոպական ողնաշարի ամսագիր 21, 1135-1142, DOI: 10.1007 / S00586-012-2147-9 (2012):
HU, ZJ, ZHAO, FD, FANG, XQ եւ օդափոխիչ, SW Modic փոփոխություններ. Հնարավոր պատճառներն ու ներդրումը Lumbar սկավառակի այլասերում: Բժշկական վարկածներ 73, 930-932, DOI: 10.1016 / J.MEHY.2009.06.038 (2009):
Krok, HV ներքին սկավառակի փչացում: Սկավառակի պրոլապի հետ կապված խնդիրները ավելի քան 50 տարի: Spine (Phila pa 1976) 11, 650-653 (1986):
Փոստի ժամանակը: Dec-13-2024